Le plafond doré s'organise autour d'un tondo central montrant Pénélope à son métier, encadré des armoiries des Médicis et des Tolède et de panneaux aux figures allongées. Cette salle de l'appartement d'Éléonore de Tolède, peinte par Stradano en 1561-1562, célèbre la fidélité de l'épouse d'Ulysse comme modèle pour la duchesse.